Romatoid Faktör Testi Nasıl Yapılır? Prensip, Prosedür, Yorumlama

0

Romatoid Faktör Testi Nasıl Yapılır? Romatoid Faktör (RF) Testi: Prensip, Prosedür, Yorumlama ve Klinik Önemi nedir, kalitatif ve yarı kalitatif yöntemler

Advertisement

Romatoid Faktör Nedir?

Romatoid Faktörler (RF), bireylerin kendi immünoglobulini ile reaksiyona giren otoantikorlardır. RF, üç ana immünoglobulin sınıfı ile ilişkilendirilmiştir: IgM, IgG ve IgA. Bu IgM ve IgG en yaygın olanlarıdır. Eklem boşluğunda immün kompleks oluşumu, romatoid artritin (RA) neden olduğu kompleman ve yıkıcı inflamasyonun aktivasyonuna yol açar.

RF, romatoid artritin tanısı ve izlenmesi için özel bir uygulamaya sahiptir. Romatoid artrit (RA), öncelikle eklemleri ve periartiküler dokuları etkileyen kronik inflamatuar bir hastalıktır. Romatoid faktör, romatoid artrit tanısı alan olguların % 60-80’inde saptanmıştır. Bununla birlikte, bazen Sistemik Lupus Eritematozus (SLE) hastalarında ve bazı romatizmal olmayan durumlarda da saptanabilir. Normal yaşlı popülasyonda da yükselmiş değerler gözlenebilir.

RF Testi Nasıl Yapılır?

RF testi için bir dizi yöntem mevcuttur. En sık kullanılan serolojik yöntem lateks aglütinasyon testine dayanmaktadır. RF, IgG molekülünün Fc bölümüne karşı yönlendirilen bir IgM sınıfı antikor olduğu için, IgG molekülü ile kaplanmış lateks parçacıklarını aglütine etme yeteneği ile saptanır.

Advertisement

Reaktif, gamma globulin ile kaplanmış pH: 8.6 ± 0.1 olan glisin-salin tamponu içinde bir polistiren lateks partiküllerinin bir süspansiyonudur.

KALİTATİF YÖNTEM

Prosedür
  • Tüm reaktifleri ve örnekleri oda sıcaklığına getirin.
  • Pozitif kontrolün bir damlasını ve hasta serumunun 40 ul’ünü slayttaki ayrı dairelere yerleştirin.
  • Yavaşça test edilecek ve kontrol edilecek her bir numune dairesine bir damla RF lateks reaktifi ekleyin.
  • Belirli bir alanın tüm alanı boyunca reaksiyon karışımını yaymak için ayrı Aplikatör çubukları / karıştırıcıları kullanın.
  • Kaydırıcıyı döner bir çalkalayıcıda 2 dakika ileri ve geri yatırın, böylece karışım yavaşça döner.
  • Parlak yapay ışık altında 2 dakika sonra aglütinasyon için gözlemleyin.
Yorumlama
  • Lateks partiküllerinin aglütinasyonu, pozitif ve önemli bir düzeyde romatoid faktörün varlığına işaret eden pozitif bir reaksiyon olarak kabul edilir.
  • Pozitif sonuç: Lateks partikül süspansiyonunun aglutinasyonu iki dakika içinde gerçekleşecek ve 18 IU / ml’den daha yüksek bir RF seviyesine işaret edecektir.
  • Olumsuz sonuç: Lateks parçacıklarının iki dakika içerisinde süspansiyon haline getirilmemesi.

YARI-KANTİTATİK YÖNTEM

İzotonik salin kullanarak, test örneğinin 1: 2, 1: 4, 1: 8, 1: 16,1: 32, 1: 64, 1: 128 kalitatif örneklerinde seri seyreltilerini hazırlayın ve şöyle devam edin:

  • Test edilecek her örnek için, 1 ila 5 arasında numaralandırılmış test tüplerine 100 µL% 0.9 salin ilave edin.
  • Test tüpü 1’e 100 µL örnek ekleyin.
  • Karışımı karıştırın. Baloncuk oluşumundan kaçının.
  • Tüp 1 ila 2’den 100 µL karışık örnek aktarın.
  • Bu seri seyreltme prosedürünü tüp 3 ila 4’te tekrarlayın ve ardından 5. Karıştırmadan sonra test tüpünden 5 100 µL atın.

Şimdi 1 ila 5 arasındaki tüpler, aşağıdaki gibi bir seyreltme serisini temsil eder:

Tüp Numarası12345
Seyreltme1:21:41:801:161:32

Test örneği olarak her seyreltiyi kullanarak nitel test prosedürünü gerçekleştirin.

Yorumlama

Titre, en yüksek dilüsyonun tersi olarak rapor edilir, bu da pozitif bir test sonucunu gösterir. Görünür aglütinasyon ile son seyreltme adımındaki titreyi okuyunuz ve romatoid faktörün yaklaşık konsantrasyonu aşağıdaki gibi belirlenebilir:

Advertisement

IU / mL’de RF = IU / mL × Titre’de lateks Gammaglobulin reaktifinin duyarlılığı.

RF TESTİN SINIRLAMALARI

  • RA tanısı alan tüm hastalarda RF saptanmamıştır.
  • Enfeksiyöz mononükleoz, sarkoidoz, sistemik lupus eritematozus, tüberküloz veya cüzzamlı ve akut veya kronik immün yanıtın diğer koşulları olan hastalarda artmış miktarlarda RF saptanabilir.
  • Pozitif bir sonuç dikkatle yorumlanmalıdır. RA tanısını doğrulamak için kantitatif testler yapılmalıdır.
  • Yüksek hemolizli ve lipemik serum ve ayrıca plazma, teste müdahale eder.


Leave A Reply